
时间:2021-03-05 浏览:3298次
酶免疫测定(enzyme immunoassay, EIA)或免疫酶技术(immunoenzymatic technique)是指用酶标记抗体或酶标记抗体进行的抗原抗体反应。它采用抗原与抗体的特异反应与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。
酶联免疫吸附(ELISA)可以:(1)免疫酶染色各种细胞内成份的定位。(2)研究抗酶抗体的合成。(3)显现微量的免疫沉淀反应。(4)定量检测体液中抗原或抗体成份。
目前常用的方法称为酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA),其方法简单,方便讯速,特异性强。
ELISA是由抗原(抗体)先结合在固相载体上,但仍保留其免疫活性,然后加一种抗体(抗原)与酶结合成的偶联物(标记物),此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性,当偶联物与固相载体上的抗原(抗体)反应后,再加上酶的相应底物,即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原(抗体)含量成正比。
实验方法
1.标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;。
9.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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